全外顯子測尊龍凱時序實驗步驟全外顯子組測序廣博使用于性命科學及農業(yè)科學商酌。微陣列芯片依據效力分類厲重有外達譜芯片全外顯子測序實踐舉措、SNP分型芯片■及甲□基化芯片■等。微陣列芯片的典范代外是Affimatrix的“GeneChip”產物，也即是邦內贊嘆的“基因芯片”或“SNP 芯片”。此類？

　　過去很長一段功夫內，邦內的 S?…NP檢 ? 測 芯 □片厲重以□△這類 的“固態(tài)”芯片為主全外 顯子組測序，尊龍凱時人生就博正在畜牧、家禽、水產 及 作物 剖釋育種檢測中有著極端得勝的使用。但因為芯片開墾本錢高、行使本錢上等題目，仍舊無△法饜▽ 足新□穎 作物育種 的低本錢的需 求。

　　圖2 Illumina iScan 行使芯片實行 基因型檢測（圖片來自匯集）！

　　靶向捕捉測序是跟著二代測序成熟后涌△現的一種低本錢高通量位點檢測技■能。這項技能早期最廣博的使用是正在醫(yī)學商酌中的全外顯子捕捉測序及遺傳疾病位點檢測中。正在邦際上全外顯子測序實踐舉措，這項技能平時稱之為“Targ eted genotypin g by sequ e★ncing”或“Geno▽ typing bytargets equencin g”，邦內平時稱之為“靶向捕捉測序”。正在醫(yī)學 根本■△商酌?和臨床檢★ 測篩查中！

　　近年來跟著本錢的降落，靶向捕捉測序技能漸漸從根本醫(yī)學及分子診斷界限擴展到農業(yè)育種界限。該技能正在農業(yè)育種中最初被使用于育種選育本錢較高的動物育種界限（比方畜牧、家禽、水產等），自后起先正在作○物育種與精○準判 斷 中大范圍的使用。外洋育種企業(yè)行使液相○捕捉測序 實行高通量的基因型判斷輔助育種能夠追溯到10年前。邦內的液相捕捉測序正在農業(yè)▽中的使用是近來幾年才成長起來，漸漸以低本=錢上風代替固相 的SNP芯片檢測。

　　正在邦內少許育種界限的△ 處事家每每行○使“液相芯片”如此的詞來實行靶向測序○處事先容。厲重因為照樣少許公司為了觀念上的“革新”，尊龍凱時人生就博將液相捕捉技能包裝成“液相芯片”來擴張。也許是近來幾年“芯片”這個詞太火了，什么=樣 的★○產物 都 生氣和芯片 扯?上□聯 系。動作腳踏實地的科研處事家，正在 分子檢測▽界限應 當沒有□找到“液相芯片”這個產物的適應英文詞組。就坊鑣前面的先容，邦際 上和■□邦內根本醫(yī)學檢測界限這項技能真正○廣博行使并得回認同的名稱是○▽靶向捕捉測序。

　　“ 液相 芯片 ”不是芯片，而是高密度的“核酸序列咸集”（仿…佛于= 高 密度引物序列），通過分子雜交的格式得 ?回特定區(qū)域 的序列訊息。固然靶向捕捉測序（“液相芯片”）不是芯片尊龍凱時，但其感化與守舊的固△ 相SNP芯片相通，都是被用○ 于實行高通□量符號檢測。

　　圖4 用于雜交捕捉實踐的帶妝點核酸存放于試管中(“探針/Probes”)！

　　方便來說，液相芯片實在即是一管“帶妝點的核酸咸集”，如上圖4。通過對 DN○A?！霭濉?實行帶 =生物 ▽素 的擴增，即可得回“液相捕捉探針”，和眾人★ 實 踐室 行 使的△引物池仿佛，兩者的區(qū)?別正在序列的長度與序列是否帶有▽生物素妝點。正在舊例實踐中，咱們平時行使■的一對引物擴增一段序列。正在靶向捕捉測序實踐中尊○龍凱時，往往★是成千上萬差異○品種的序列，可能同 時與基因組差異區(qū)域實行雜交。因為核酸合成與擴增本?錢極 端低，因而液相捕捉技能可能?供給極端低的檢測價★值。

　　須要出格提防的是，又有一種 早期廣博使用的高通量 基因分型技能△叫做“Genotyping by sequencing(GBS)” 或者”Restrictio▽n site-associ=a…ted DNA se○□quencing (RAD-Seq)“簡化基因△組測序技能全外顯子測序實踐舉措。這是一類操縱酶切得回基因組片斷并實行測序的技能 全外顯子組測序。因為技能道理酶切的不褂訕全外顯子組測序，導致這項技能位點檢測的反復○性差，并不△是一種固定位點檢測技能。